三代全長 16S 測序分析主要是對 16S 全長進行擴增,基于PacBio 測序平臺測序,然后結合生物信息學分析,對微生物多樣性及群落組成差異進行研究。相比較二代測序只選擇 1-2 個高變區進行測序,三代可以獲得全長的 16S 序列,更多變異區信息可以提高物種鑒定的分辨率,還可以提高對于群落組成的鑒定的精度,更加真實的還原樣本中微生物群落結構。
基于三代Pacbio Sequel測序,直接測通16S rRNA的全長序列,物種分類可精確到“種”
建庫階段無PCR過程,因此測序過程無GC偏好性,數據結果更加準確
CCS序列自我校正,測序錯誤率大幅下降,數據一致性好,堿基準確度可達99.99%
DNA提取與質檢
全長擴增
產物純化
混樣建庫
Pacbio測序
Pacbio sequel
5000 CCS
60個工作日